CRISPR genome editing service

GenCRISPR基因组编辑服务

CRISPR-Cas9系统,被称为第三代基因编辑技术。相比于它的两位前辈ZFN系统和TALEN系统,它有着一些无可比拟的优点。首先,CRISPR-Cas9系统的可用位置更多。理论上基因组中每8个碱基就能找到一个可以用CRISPR-Cas9进行编辑的位置,可以说这一技术能对任一基因进行操作;其次,CRISPR-Cas9系统更具有可拓展性,例如可以通过对Cas9蛋白的修饰,让它不切断DNA双链,而只是切开单链,这样可以大大降低切开双链后带来的非同源末端连接造成的染色体变异风险。此外还可以将Cas9蛋白连接其它功能蛋白,实现在特定DNA序列上研究这些蛋白对细胞的影响。由于以上优点,CRISPR-Cas9被评为2013年生物学十大突破之一。

金斯瑞提供从基因信息、细胞、测序、分析到目的细胞系构建一站式技术服务,我们的GenCRISPR™基因组编辑技术,适用于任何基因的靶位点及哺乳动物细胞。金斯瑞专业的科研人员具备丰富的CRISPR基因组编辑经验,包括设计gRNA、细胞转染、单克隆细胞培养及传代、转染困难细胞系的基因编辑和构建肿瘤细胞系。服务完成后,我们将交付给您指定基因编辑后的单克隆细胞以及详细的项目报告。

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Case Studies: KO and KI cell lines created with GenCRISPR genome editing service

Using viral-based GenCRISPR™ to develop a homozygous K-ras knock-out in HCT116 cells See more »

Using GenCRISPR™ to develop a glutamine synthetase (GS) knockout DG44 cell line See more »

Using GenCRISPR™ to develop a GLP-1R knock-in cell line See more »

Using GenCRISPR™ to knock-in GFP with a puromycin selection marker See more »


GenCRISPR™ 服务流程图

GenCRISPR™ Workflow

服务说明

GenCRISPR™ 细胞系构建服务
交付内容
交付时间
Knock-out细胞系
  • 病毒(Lenti-CRISPR和AAV-CRISPR技术)或传统转染方法
  • 客户指定的基因/位点区和感兴趣的细胞系*
  • 单克隆,已确认的靶位点序列
  • gRNA靶点序列设计及目标区域测序报告
16-20 周,最终交付时间取决于靶点的复杂程度以及细胞系生长情况
Knock-in细胞系
  • 病毒(即将上线)或传统转染方法
  • 客户指定目标基因/位点和提供的目标插入序列或突变
  • 客户同样可以指定感兴趣的细胞系*
  • 单克隆,靶序列及已确认的knock-in基因序列
  • gRNA靶点序列设计及 knock-in 同源臂序列详细报告
20-25 周,最终交付时间取决于靶点的复杂程度、插入序列的具体情况以及细胞系生长情况

*一般由客户提供细胞系,如果金斯瑞提供细胞系,则需额外收费。金斯瑞除常规细胞系之外,还可以提供超过240多种的肿瘤细胞系


传统转染方法(Transfection-based) 病毒转染法(Viral-based)
服务内容
  • 脂质体转染(lipofection)或核转染(Nucleofaction),需提供Cas9、gRNA以及插入序列(for knock-in)
  • 慢病毒转染(lentivirus)或腺相关病毒(adeno-associated virus),需提供Cas9、gRNA以及插入序列(for knock-in)
服务优势
  • 可选择使用嘌呤霉素(puromycin)、GFP等多种标记,筛选已转染的细胞
  • 较大的插入型载体,适用于敲入服务
  • 细胞系构建速度更快
  • 非分裂细胞以及重组蛋白生产常用的宿主细胞的交付率更高
  • Cas9及gRNA低表达可降低脱靶效应
不适用于
  • 不适用于难转染的细胞系
  • 转染效率低可能会延长单克隆化的时间
  • 使用病毒包装时,插入序列的长度受限制
适用于
  • 生产重组蛋白的细胞系如:HEK293、CHO
  • 任何难转染的细胞系

可选服务
服务内容
附加单克隆
从同一个细胞库中挑选出另外一个单克隆,发给客户,附加的目标序列分析将包含在最终的报告中。
附加目的基因
客户需指定目的基因是否需同时编辑,或者哪一条靶基因需优先编辑。
脱靶 QC 数据
我们将提供给客户一份脱靶基因评估表,列举出可能会脱靶的基因,客户可根据列表选择基因进行测序,最终我们将提供给客户目标区域测序的详细报告。
单克隆功能验证
我们的 体外药效学筛选平台 可提供下方的服务:
细胞生长和凋亡
GPCRion channel assays
细胞内western
肿瘤细胞筛选

 

服务优势

  • 只需客户提供目的基因,从基因合成、设计gRNA及修复模板、细胞转染、单克隆制备、到单克隆测序分析,提供真正一站式服务;
  • 不存在专利问题,合法使用CRISPR-Cas9技术;
  • 不使用抗生素筛选,无额外添加如GFP、或其他标签的基因(仅限基因敲除项目);
  • 全球基因合成供应商,确保序列正确 ;
  • 体外药效学部门具备丰富细胞培养经验,已成功构建过250多种细胞系 ;
  • 无双抗添加细胞培养,严格确保无菌操作及无菌环境。

相关服务

询价与订购

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    CRISPR™产品和服务执照许可
  • 金斯瑞为客户提供的GenCRISPR™产品和服务得到美国 Broad 研究所,哈佛大学和麻省理工学院授权许可。GenCRISPR™产品和服务受到US 8,697,359, US 8,771,945, US 8,795,965, US 8,865,406, US 8,871,445, US 8,889,356, US 8,889,418, US 8,895,308, US 8,906,616及多国同等专利保护。
  • GenCRISPR™产品和该服务中生成的试剂只能作为工具用于科学研发目的,不得用于以下用途:
    (1)任何人体或临床的使用;(2)修改任何人类生殖体系,包括改变人类胚胎或人的生殖细胞的DNA;(3)任何作为兽药或在牲畜体内的使用;(4)制造、批发、进口、出口、运输、销售、许诺销售、市场营销及推广,或其他开发,对人类或动物的测试服务,治疗或诊断。
  • GenCRISPR™服务使用者和产品的购买者:
    不可转让GenCRISPR™产品和该服务中生成的试剂于第三者。GenCRISPR™产品和该服务中生成的试剂只能作为工具用于科学研发目的,不得用于任何商业目的。

客户应明确知晓上述对试剂用途的限制,并自行承担因违反该限制而产生的法律责任。

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