Cas9 RNP服务

Synthetic crRNA服务

CRISPR Cas9/gRNA RNP(核糖核蛋白复合物)由CRISPR RNA(crRNA)和tracrRNA部分双链RNA复合物及cas蛋白组成。不同于传统的Cas9/gRNA质粒,crRNA和tracrRNA寡聚核苷酸是完整的组分,不需要细胞自身转录得到CRISPR相关组分。Cas9 RNP与其它系统相比有多个优点:

  • Cas9 RNP在转染后即刻发生高效率基因编辑
  • Cas9 RNP通过蛋白降解可快速清除以降低脱靶可能性
  • Cas9 RNP是in vivo基因编辑的完美方案

金斯瑞提供预先设计的RNP靶点,化学合成crRNA与tracrRNA,与cas9简单混合后,即可用于基因编辑。

服务优势

  • 提供gRNA设计:可从Broad研究所验证的gRNA序列中选择,或由您自主设计;
  • gRNA以部分双链的crRNA:tracrRNA形式提供,不再需要体外转录实验;
  • 即刻可用于转染等实验:只需与蛋白混合,得到复合物后,即可用于细胞实验;
  • 灵活订购,多种规格可选。

服务内容

Catalog # 服务名称 交付量 交付周期
SC1838
crRNA:tracrRNA
2 nmol
5 nmol
10 nmol
20 nmol
10-14天
(包含快递时间)
SC1841
GenCRISPR Cas9-2NLS nuclease
10 μg (1 mg/ml)*
25 μg (1 mg/ml)
现货*
SC1839
HPRT阳性对照
  • 包括crRNA:tracrRNA 和HPRT 引物
2 nmol 现货*

*Cas9-2NLS nuclease 10μg相当于62.5 pmol

如何订购

Cas9 RNP workflow

Cas9 RNP

Figure 1: Cas9 RNP workflow

Cas9 RNP系统操作简单,使用方法仅两步: (1)将Cas9蛋白与合成的crRNA : tracrRNA孵育形成RNP;(2)将RNP导入细胞(Figure 1)。如进行基因敲入,还需将HDR模板也一起导入细胞。在开始实验之前,我们建议您先将Cas9/gRNA 复合物在体外及test细胞系中进行测试,以评估编辑效率。关于如何形成RNP复合物及操作预实验可见操作手册

通常采用电穿孔或脂质介导转染的方法,将Cas9 RNP复合物导入细胞。针对不同的细胞类型,您可能需要进行一些实验,才能选择较好的转导方式。不过,Cas9/gRNA 质粒转导方法有时同样也适用于RNP转导。关于此操作的更多细节,可在Addgene网站查看。

交付内容

  • 合成的crRNA:tracrRNA可交付2 nmol, 5 nmol, 10 nmol or 20 nmol的量
  • 以冻干的形式发货
  • 随Cas9蛋白(10 μg或25 μg)附赠Cas9核酸酶反应缓冲液
  • 随货附操作指南

    CRISPR™产品和服务执照许可

  • 金斯瑞为客户提供的GenCRISPR™产品和服务得到美国 Broad 研究所,哈佛大学和麻省理工学院授权许可。GenCRISPR™产品和服务受到US 8,697,359, US 8,771,945, US 8,795,965, US 8,865,406, US 8,871,445, US 8,889,356, US 8,889,418, US 8,895,308, US 8,906,616及多国同等专利保护。
  • GenCRISPR™产品和该服务中生成的试剂只能作为工具用于科学研发目的,不得用于以下用途:
    (1)任何人体或临床的使用;(2)修改任何人类生殖体系,包括改变人类胚胎或人的生殖细胞的DNA;(3)任何作为兽药或在牲畜体内的使用;(4)制造、批发、进口、出口、运输、销售、许诺销售、市场营销及推广,或其他开发,对人类或动物的测试服务,治疗或诊断。
  • GenCRISPR™服务使用者和产品的购买者:
    不可转让GenCRISPR™产品和该服务中生成的试剂于第三者。GenCRISPR™产品和该服务中生成的试剂只能作为工具用于科学研发目的,不得用于任何商业目的。

客户应明确知晓上述对试剂用途的限制,并自行承担因违反该限制而产生的法律责任。

订购信息

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