CRISPR SaCas9 constructs

SaCas9质粒构建

SaCas9是来源于Staphylococcus aureus的Cas9核酸酶,与SpCas9具有相似的DNA切割效率;而SaCas9结构更小,比SpCas9小25%,使得AAV Cas9包装成为可能。SaCas9最主要的优点在腺相关病毒(AAV)包装中:AAV的包载大小约为4.5 kb,包装SpCas9到载体中有一定的困难(Ran et al, 2015)。由于构建的SaCas9质粒具有更低的免疫原性,因此SaCa9更适用于体内基因编辑的应用,如治疗。与其它Cas9异构体核酸酶相同,SaCas9的另一大优势是特异性强。SaCas9酶能够识别更长的PAM序列,识别位点为NGRRT或NGRRN。由于具有更长的序列长度,这个PAM序列在基因中出现的频率更低,大约每32 bp中出现一次,而NGG约每8 bp中出现一次(Kleinstiver et al, 2015)。使用SaCas9质粒载体,建议gRNA的长度为21-23 bp。对于AAV包装,pAAV血清型包装质粒和pDF6辅助质粒也是必需的。

SaCas9 all-in-one载体

金斯瑞目前提供all-in-one AAV载体用于SaCas9质粒构建:

Vector type Vector Name gRNA promoter All-in-one vector? Selection/Screening
Markers
Vector Map Vector Price
AAV PX601 U6 Yes
Driven by CMV
promoter with N-terminal NLS
AmpR PX601 vector map quote,
10 business day turnaround

服务交付

  • 4 µg研究级别的质粒DNA
  • QC数据文件:
    • 含有目的基因的质粒测序图谱 (电子版)
    • 质粒结果图(电子版)
    • 质量认证书

注:如需制备其它规格或转染级的质粒,需额外收费,详情可查看金斯瑞质粒DNA制备服务

参考文献


    CRISPR™产品和服务执照许可
  • 金斯瑞为客户提供的GenCRISPR™产品和服务得到美国 Broad 研究所,哈佛大学和麻省理工学院授权许可。GenCRISPR™产品和服务受到US 8,697,359, US 8,771,945, US 8,795,965, US 8,865,406, US 8,871,445, US 8,889,356, US 8,889,418, US 8,895,308, US 8,906,616及多国同等专利保护。
  • GenCRISPR™产品和该服务中生成的试剂只能作为工具用于科学研发目的,不得用于以下用途:
    (1)任何人体或临床的使用;(2)修改任何人类生殖体系,包括改变人类胚胎或人的生殖细胞的DNA;(3)任何作为兽药或在牲畜体内的使用;(4)制造、批发、进口、出口、运输、销售、许诺销售、市场营销及推广,或其他开发,对人类或动物的测试服务,治疗或诊断。
  • GenCRISPR™服务使用者和产品的购买者:
    不可转让GenCRISPR™产品和该服务中生成的试剂于第三者。GenCRISPR™产品和该服务中生成的试剂只能作为工具用于科学研发目的,不得用于任何商业目的。

客户应明确知晓上述对试剂用途的限制,并自行承担因违反该限制而产生的法律责任。


订购信息