蛋白表达服务

金斯瑞蛋白表达服务为您提供从基因合成(免费的密码子优化)到蛋白表达、纯化等一体化服务。你可以免费使用我们的稀有密码子优化工具,来检测您的基因序列是否最佳,以提高您的目的蛋白表达水平。

  • 服务
  • 服务优势
  • 服务实例
  • 客户科研成果

1.强力推荐:Guaranteed蛋白表达服务包(套餐)——3 mg已纯化的可溶性蛋白(Cat.No. SC1253)
服务内容
交付内容
交付时间
  • 亚克隆
  • 表达优化及测试
  • 表达并纯化蛋白
  • 至少3 mg已纯化的可溶性标记蛋白
  • QC报告
  • 4–5周
2.BacPowerTM原核表达系统 (Cat.No. SC1318)
特点
交付内容
交付时间
  • 亚克隆
  • 少量表达和优化
  • 蛋白表达和纯化
  • SDS-PAGE以及Western blot分析
  • 已纯化的可溶性蛋白
  • QC报告
  • 4–6周
3.YeastHIGHTM酵母表达系统(高级套餐: SC1346/标准套餐: SC1257)
特点
交付内容
交付时间
  • 亚克隆,重组酵母载体的扩大化培养
  • 在不同宿主中进行表达测试及表达条件的优化
  • 一步或多步亲和层析法纯化蛋白
  • SDS-PAGE以及Western blot分析
  • 细胞收集物或已纯化的可溶性蛋白
  • QC报告
  • 4–6周
4.BacuVanceTM杆状病毒表达系统 (优化套餐: SC1347/标准套餐: SC1258)
特点
交付内容
交付时间
  • 重组杆粒DNA的扩大化培养以及高滴定浓度的病毒繁殖
  • 使用qPCR方法或空斑检测法确认病毒滴度
  • 用高滴定浓度的病毒感染昆虫细胞(Sf9,Sf21,Hi5)
  • 一步或多步亲和层析法纯化蛋白
  • SDS-PAGE以及Western blot分析
  • 高滴定病毒株
  • 细胞收集物/ 上清液或已纯化的可溶性蛋白
  • QC报告
  • 6–8周
5.哺乳动物细胞表达系统 (Cat.No. SC1259/SC1260)
能力
交付内容
交付时间
  • 瞬时表达和纯化
  • 稳定细胞株构建
  • 工艺研发和转让
  • 大规模蛋白制备
  • 融合蛋白或无标签蛋白
  • 稳定细胞株:3×3克隆
  • QC报告
  • 3-4周/具体时间参考具体项目
1.用于提高基因表达水平的OptimumGeneTM密码子优化技术
金斯瑞先进的OptimumGeneTM密码子优化技术能帮助您优化基因序列,使基因表达和蛋白溶解度达到较高水平。OptimumGeneTM技术还可用来优化很多与转录、翻译、蛋白折叠相关的参数。

2.较高的成功率以及丰富的重组蛋白制备经验
我们已经为客户制备了数以千记的复杂蛋白,其中包括:跨膜蛋白,分泌蛋白,蛋白酶以及其它的酶类,成功率均在90%以上。金斯瑞制备的重组蛋白已成功应用于靶点确认、酶鉴定、抗体制备、高通量筛(HTS)、 构象研究以及SAR(结构-活性关系)。

3.BacPowerTM技术和FoldArtTM蛋白折叠技术
金斯瑞自主研发的BacPowerTM技术和FoldArtTM蛋白折叠技术,使蛋白难表达和蛋白难溶等问题迎刃而解。

4.全面的服务
金斯瑞能为您提供基因合成,蛋白表达,稳定细胞株生产,抗体制备以及免疫检测等一体化服务。

5.高质量的服务
金斯瑞高质量的蛋白表达服务,可满足您对蛋白的纯度高、活性强、交付时间快等需求。金斯瑞交付的蛋白一般纯度在95%以上,内毒素水平低于0.01 EU/µg。
1.生物活性蛋白

药物研发过程中,制备和纯化后的蛋白具有生物活性是十分必要的。金斯瑞先进的设备和专利的制备方法,保证了交付给客户的蛋白均具有生物活性。我们进行蛋白表达与免疫检测相结合,交付给客户的高质量、高活性蛋白,甚至超过了客户的预期,具体请参考下面的示例。我们通过对细胞破壁方法进行优化,提高了纯度大于90%的目标蛋白的获得量。
Fig.A: SDS-PAGE analysis of the fractions upon the IEX chromatography 。
Lane 1-47: Gradient elution fractions
Lane M: Low weight marker (Jinsite, Cat. No. MM0906)
Lane S: The supernatant after homogenizer with high pressure
Lane ft: Flow through

Fig.B: Enzyme assay monitoring the fractionation by DEAD Sepharose

Fig. C: Fractions pooled based on activity analysis for further ADP Sepharose affinity purification
Fig. D: SDS-PAGE analysis of the purified protein
Lane M: Low weight marker (Jinsite, Cat. No. MM0906)
Lane S: The supernatant after homogenizer with high pressure
Lane ft: Flow through

2.蛋白折叠

金斯瑞专利的蛋白折叠技术,可以解决原核系统内由于过量表达而带来的蛋白活性丧失、折叠错误、蛋白发生集聚反应不能溶解等问题。我们可以成功溶解并折叠含有95%以上包涵体的目标蛋白(请参考下述示例),折叠蛋白的纯度高达85%以上。金斯瑞交付给客户的折叠蛋白储存于特制缓冲液中。
Fig. Refolded protein of sample was analyzed by SDS-PAGE followed by Coomassie Brilliant Blue staining
Lane M: Smart Protein Standard (Jinsite, Cat. No. MM0900)
Lane 1: Refolded protein of sample

3.标签去除

重组蛋白中如果含有表位附加标签,可能会导致蛋白结构改变、产生毒性,甚至丧失活性。为了避免这类问题,很多客户在蛋白表达后要求去除标签。在下面的示例中,金斯瑞使用SUMO蛋白酶,成功去除了标签。获得的目标蛋白标签去除率为80%,纯度高达90%以上。
SDS-PAGE checking purification of protein after tag cleavage by SUMO protease
Fig. A:
Lane M: Smart Protein Standard (Jinsite, Cat.No. MM0900)
Lane 1: Refolded fusion protein with SUMO-tag
Fig. B:
Lane M: Smart Protein Standard (Jinsite, Cat.No. MM0900)
Lane 1: Recovered protein after 1st incubation with Ni-resin
Lane 2: Recovered protein after 2nd incubation with Ni-resin
Lane 3: Elute with 300 mM imidazole from Ni-resin of 2nd incubation
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