高亲和Ni-NTA纯化介质(L00250)是把螯合剂(氮川三乙酸或NTA)共价偶联到琼脂糖介质(4%交联)上,然后再螯合Ni2+制备而成。NTA能够通过四个位点牢固的螯合Ni2+从而减少纯化过程中Ni2+泄露到蛋白样品中。本纯化介质可以纯化任何表达系统(原核,酵母,昆虫细胞和哺乳动物细胞等表达系统)表达的天然或变性的His-标签蛋白。结合在介质上的蛋白可以通过低pH缓冲液、咪唑溶液甚至组氨酸溶液洗脱下来。
结合能力可以达到20mg 6xHis标签蛋白/ml介质(CV)
pH3-13的范围内都能有好的纯化效果, pH2和pH14的条件下也可以短期使用
图1. E. coli细胞30kD可溶性重组His标签蛋白Ni-NTA Resin纯化对照 | |
Lane1:流出液(某公司) | Lane5:流出液(金斯瑞) |
Lane2:洗涤液(某公司) | Lane6:洗涤液(金斯瑞) |
Lane3:洗脱液(某公司) | Lane7:洗脱液(金斯瑞) |
Lane4:残留物(某公司) | Lane8:残留物(金斯瑞) |