蛋白A ELISA试剂盒

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检测原理

• 原理示意图
  

  图1. Protein A ELISA Kit, 2G (GenScript, L01043)检测原理图

应用实例

• 适用范围广
  

  图2. L01043试剂盒检测不同类型Protein A的标准曲线
  L01043试剂盒可用于检测天然Protein A、普通重组Protein A和耐碱性重组Protein A等数种常见Protein A亲和树脂的配基。检测Protein A范围最低可至50 pg/mL。

  表1. L01043试剂盒对不同类型Protein A 的检测范围

  Protein A ligand standard	Typical assay working ranges
  MabSelect PrismA (Cytiva)	0.0625 – 4 ng/mL
  AT Protein A (Bestchrom)	0.0625 – 4 ng/mL
  MabSelect SuRe (Cytiva)	0.1 - 6.4 ng/mL
  UniMab 50HC Protein A (NanoMicro)	0.2 - 12.8 ng/mL
  MabPurix Protein A (Srpax)	0.05 - 3.2 ng/mL
  rSPA (Repligen)	0.1 - 6.4 ng/mL

• IgG耐受性强
  

  图3. L01043试剂盒检测不同浓度IgG样本中的Protein A
  高浓度IgG会破坏Protein A与Protein A抗体之间特异性识别，导致回收率显著降低检测结果不准确。L01043检测试剂盒受样本中IgG浓度影响小，在10 mg/mL的IgG样本中回收率可达90%以上。

  表2. L01043试剂盒在高浓度IgG 中的Protein A回收率

  Protein A (ng/mL)	Spiked to 1 mg/mL human IgG		Spiked to 10 mg/mL human IgG
  	Measured (ng/mL)	Recovery Rate	Measured (ng/mL)	Recovery Rate
  3	2.795	93%	2.816	94%
  0.5	0.463	93%	0.453	91%
  0.1875	0.184	98%	0.174	93%

• 稀释线性好
  

  图4. L01043试剂盒稀释线性检测
  L01043试剂盒检测Protein A结果不受样本稀释因子的影响。

  表3. L01043试剂盒检测Protein A浓度在线性稀释前后具有一致性

  Sample	Mean N-fold dilution (ng/mL)	Mean 2N-fold dilution (ng/mL)	Mean 4N-fold dilution (ng/mL)	CV
  Sample A	0.49	0.41	/	12.57%
  Sample B	0.94	0.83	/	8.79%
  Sample C	91.25	96.25	97.6	3.52%
  Sample D	131.92	135.63	140.73	3.25%
  Sample E	1125.72	1190.24	1166.47	2.81%
  Sample F	1400.13	1458.67	1530.93	4.48%

• 日间精密度高
  

  图5. L01043试剂盒日间精密度检测
  L01043试剂盒检测Protein A结果不受检测时间影响。

  表4. L01043试剂盒检测同一样本不同时间的检测结果具有一致性

  Sample	Mean (ng/mL)			CV
  	Day 1	Day 2	Day 3
  Sample A	0.45	0.56	0.53	11.08%
  Sample B	0.88	0.92	0.78	8.39%
  Sample C	95.03	97.26	84.12	7.63%
  Sample D	136.09	135.53	126.42	4.09%
  Sample E	1160.81	1116.52	1064.91	4.31%
  Sample F	1463.24	1486.2	1548.44	2.94%

• 批间/批内精确度高
  

  图6. 不同批次L01043检测不同样本中MabSelect PrismA 的浓度
  L01043检测试剂盒的批内精确度＜10%，批间精确度＜15%。

  表5. 不同批次的L01043试剂盒检测同一样本结果

  MabSelect PrismA (ng/mL)	Intra-assay		Inter-assay
  	Mean (ng/mL)	CV	Mean (ng/mL)	CV
  3	2.795	3.78%	2.794	4.21%
  0.5	0.457	4.08%	0.459	4.84%
  0.1875	0.173	5.75%	0.179	11.41%

• 回收率稳定
  

  图7. L01043检测不同样本中Protien A的回收率
  L01043对不同样本体系中Protein A的回收率稳定在80%~120%。

  表6. L01043试剂盒检测不同样本中Protein A的回收率数据

  Samples Purified by MabSelect PrismA	Spiked with 1 ng/mL MabSelect PrismA		Spiked with 0.25 ng/mL MabSelect PrismA
  	Measured Spiked MabSelect PrismA (ng/mL)	Recovery Rate	Measured Spiked MabSelect PrismA (ng/mL)	Recovery Rate
  Sample A	1.02	102%	0.213	85%
  Sample B	0.887	89%	0.209	84%
  Sample C	0.971	97%	0.236	94%
  Sample D	1.151	115%	0.229	92%
  Sample E	1.047	105%	0.274	110%
  Sample F	1.044	104%	0.298	119%

常见问题解答

• 1. Protein A ELISA Kit和Protein A ELISA Kit, 2G两款试剂盒如何选择？

  如果您使用的protein A填料是MabSelect SuRe，我们推荐您使用Protein A ELISA Kit（产品编号：L00430）；

  如果您使用的protein A填料是MabSelect PrismA，我们推荐您使用Protein A ELISA Kit, 2G（产品编号：L01043）；

  如果客户端使用的是其他protein A填料，我们推荐优先选择Protein A ELISA Kit, 2G（产品编号：L01043）,因为该款试剂盒经过优化，具有更简单的样本处理方式和更优的回收率，且对不同结构的Protein A具有更好的适用性。

• 2. 试剂盒中提供的阳性对照标准品是什么？浓度是多少？

  Protein A ELISA Kit（产品编号：L00430）提供了两种阳性标准品，分别是重组Protein A标准品（浓度为10 μg/ml）和MabSelect SuRe Protein A标准品（浓度同样为10 μg/ml）；

  Protein A ELISA Kit, 2G（产品编号：L01043）提供了MabSelect PrismA标准品（浓度为1 μg/ml）；

  这些标准品用于在实验过程中建立标准曲线，以确保结果的准确性和可重复性。

• 3. 如果客户端使用的protein A与试剂盒中提供的Protein A标准品不同，那么该如何选择标准品？金斯瑞是否提供？

  金斯瑞Protein A ELISA Kit（产品编号：L00430）和Protein A ELISA Kit, 2G（产品编号：L01043）可以识别不同结构的天然Protein A、重组Protein A、耐碱性Protein A。为了更准确的定量样本中残留的Protein A，建议使用与纯化介质中相同的protein A配基作为标准品，并参考试剂盒中描述的方法和法规的要求进行验证。金斯瑞不提供这些额外的标准品，建议从纯化介质供应商购买。

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