pegRNA（Prime Editing guide RNA）合成服务

全化学合成pegRNA长达231 nt，编辑效率经验证
无双链断裂、无需模板！支持更安全的基因编辑方案

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概览

Prime Editor（先导编辑器）具有无双链断裂、无需模板的优势，是更安全的基因敲除、敲入、突变方案。Prime Editor由Cas9-逆转录酶和pegRNA两部分构成。其中，pegRNA由引导序列（Spacer）、骨架序列（Scaffold），带有编辑位点（Edit）的逆转录模板（RTT）、逆转录引物结合位点（PBS）组成。Cas9-逆转录酶会在pegRNA的引导下，精准地切开靶标DNA单链，根据逆转录模板，合成含有正确序列的DNA，完成基因编辑。

pegRNA长度一般在110nt以上，金斯瑞在化学合成长链RNA方面具有丰富的经验，可以供分子量精准、纯度高的产品，支持脱盐与HPLC纯化、200+种修饰及各种定制化需求。

CRISPR/Cas9基因编辑

客户感言

Shawn Yang

Prime Medicine

I have been using GenScript to order customized critical reagents for an important assay. GenScript can always deliver materials efficiently with good quality. Their technical support is great to address any additional questions.

服务优势

长达231 nt！支持脱盐和HPLC级别

分子量精准，纯度高
批次间一致性好

经验证！基因编辑效率高

编辑效率可超过60%
默认修饰提升编辑效率

一站式解决方案

提供PE2/PE3 mRNA
提供经实验验证的操作指南

RUO至GMP级别的产品

全程支持您的项目从研发阶段
走向临床研究和IND申报

服务详情

服务名称	长度范围	修饰*	纯化方式	交付量	报告	生产周期（工作日）	价格
pegRNA	110-231 nt	默认修饰更稳定	脱盐	2-100nmol 干粉（默认） TE buffer / Nuclease-free water（可选）	MS和COA报告 (HPLC纯化级别提供HPLC报告，纯度≥85% ^#)	7天起	欢迎详询
pegRNA	110-231 nt	默认修饰更稳定	HPLC纯化	2-100nmol 干粉（默认） TE buffer / Nuclease-free water（可选）	MS和COA报告 (HPLC纯化级别提供HPLC报告，纯度≥85% ^#)	7天起	欢迎详询

* pegRNA任意位置添加任意数量的常规2'-甲氧基，硫代修饰不额外收费，其他可提供200种+定制化修饰，请详询。
# 200 nt内纯度可以保证≥85%，200 nt以上请详询。

案例分享

218 nt pegRNA：脱盐与HPLC纯化级别，分子量精准、纯度高

HPLC纯化的pegRNA (218nt)：分子量精准

脱盐纯化的pegRNA (218nt)：分子量精准

HPLC纯化的pegRNA (218nt)：纯度高达 92.78%
添加3'tevopreQ1 motif修饰，218 nt pegRNA编辑效率提升至43.4%

实验方法: HEK293T cells (0.2 x 10⁶个细胞) ，电转1μg PE2/PE3 mRNA, 30pmol nicking sgRNA和90pmo不同长度的pegRNA (HPLC纯化) ，靶向HEK3位点。3天后提取基因组DNA，通过Sanger测序检测基因编辑效率。

实验结果： 添加 3'tevopreQ1 motif的pegRNA编辑效率可高达43.4%，远高于不加该结构的pegRNA。

备注：218nt pegRNA是181nt pegRNA添加37nt tevopreQ1 motif 组成，据报道tevopreQ1 motif 可以帮助pegRNA的3'端不被核酸外切酶降解。 (Nelson, J. W. et al., 2022).
141 nt pegRNA：编辑效率高达63.5%

HPLC纯化pegRNA (141nt) : 分子量精准

HPLC纯化pegRNA (141nt) : 纯度高

实验方法: HEK293T cells (0.2 x 10⁶个细胞) ，采用电转方式，以3：1的比例加入脱盐或HPLC纯化的pegRNA (141nt) 和nicking sgRNA，同时加入0.15 μg，0.25 μg，0.375 μg，0.5 μg，0.75 μg，1.0 μg的PE2/PE3 mRNA，靶向HEK3位点，敲除5bp碱基。3天后提取基因组DNA，通过Sanger测序检测基因编辑效率。

实验结果： HPLC 纯化pegRNA编辑效率高达63.5%，脱盐pegRNA编辑效率高达52.5%，编辑效率呈剂量依赖增长。
脱盐与HPLC纯化级别的pegRNA细胞毒性低

实验方法: HEK293T 细胞 (0.2 x 10⁶个细胞) ，以3：1的比例加入脱盐或HPLC纯化的pegRNA (141nt) 和nicking sgRNA，同时分别加入0.5μg、0.75μg、1.0μg的PE2/PE3 mRNA，靶向HEK3位点。3天后，检测细胞毒性，相对细胞活性% = pegRNA加样组细胞数量 / 空白组细胞数量。

实验结果: 脱盐或HPLC纯化的pegRNA在45 pmol，67.5 pmol，90 pmol的浓度下对HEK293T细胞无明显细胞毒性。