成功制备抗体的关键-多肽vs蛋白抗原选择

成功制备抗体的关键-抗原选择

选择合适的抗原是您开始定制抗体项目时重要的决定之一。如果您不确定如何开始，首先要考虑目标蛋白的性质以及您期望的应用。这些因素应作为指导抗原选择策略的必要指南。 对于大多数项目，可以选择两种方法之一来实现定制化抗体生产。第一种也是较受欢迎的是使用蛋白作为免疫原。第二种运用抗原设计软件，基于靶蛋白的天然序列预测出的短肽序列作为免疫原。下面提供了一个信息指南指导您选择哪一种策略。

为什么选择蛋白抗原免疫？

• 您需要一种适用于多种应用的抗体
• 您的目标蛋白与其他蛋白的序列相似性低，易于表达和纯化，且无毒

适用于以下应用：

为什么选择多肽抗原免疫？

• 您的预期抗体应用仅包括WB，ELISA或翻译后修饰检测。
• 您的目标蛋白与其他蛋白具有高度的序列相似性，很难或不可能表达和纯化。

适用于以下应用：

多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。当目标蛋白的获取受限时，多肽是一种合适的解决方案。它们也是检测靶蛋白翻译后修饰（PTM）位点的理想抗原，因为它们限制了潜在表位的数量。虽然潜在表位少对于大多数抗体项目和应用来说是缺点，但是当产生PTM抗体时，有限数量的表位使得发现仅针对PTM位点的反应性抗体更易。

多肽抗原的局限性

多肽抗原由于其价格低和周期短而具有吸引力，但更重要的是要考虑它的局限性。蛋白质抗原能够诱导针对构象表位的抗体，而针对肽抗原的抗体只能识别线性表位。尽管多肽产生的抗体可以在其他应用中起作用。但多肽抗原的价值主要体现在翻译后修饰检测抗体的制备。例如，抗多肽抗体可以应用于Western blots和ELISA。然而，线性化蛋白必须包括用于免疫的固有线性多肽抗原的表位，以确保阳性结果。

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