网络研讨会 » 3步剖析腺苷酸化抗体开发实例 - 金斯瑞
翻译后修饰(PTM)大大拓宽了特定蛋白质组的功能范围,对于蛋白的识别和调控的理解具有重要的研究意义。然而,识别的高亲和力,识别修饰之间小而重要的差异以及相关的交叉反应的危险一直是抗体开发的挑战。
腺苷酸化也是一种PTM,腺苷酸化在细菌感染和蛋白质稳态中发挥作用,本次网络研讨会重点关注小鼠腺苷酸化单克隆抗体的开发,包括腺苷酸化多肽的设计,特异性结合和主链不依赖型选择过程,以及前导抗体的表征及其潜力等。
腺苷酸化是指通过一磷酸腺苷 (AMP) 对蛋白质进行翻译后修饰。 腺苷酸化发生在蛋白质侧链丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基的羟基上。 在人类中,腺苷酸转移酶 FICD 参与催化 AMP 从 ATP 转移到靶蛋白。
目前没有用于检测甲基化蛋白的特异性和可靠的抗体,Dorothea 的项目专注于开发一种可以特异性检测翻译后修饰的单克隆抗体。 理想情况下,抗体能够识别小的腺苷酸修饰,区分腺苷酸化和其他密切相关的修饰。 为了实现这一目标,Dorothea使用了一种短而简单的具有非免疫骨架的腺苷酸化多肽用于动物免疫。
用于特异性和灵敏检测腺苷酸蛋白的抗体开发依赖于金斯瑞的定制单克隆抗体生成服务。在该项目中,用合成腺苷酸化多肽免疫10只小鼠,从脾脏中分离产生抗体的 B 细胞与骨髓瘤细胞融合,用于开发杂交瘤细胞。
Dorothea Höpfner在慕尼黑大学学习分子生物技术和生物化学,在美国旧金山的拜耳医药保健有限责任公司的Biologics Research实习。 她目前是慕尼黑工业大学的博士研究生,在德国UKE生物化学和信号转导系的Aymelt Itzen实验室专注于细菌感染环境中的腺苷酸化。她的工作得到Konrad Adenauer基金会的支持。