单链抗体(Single-Chain Fragment Variable, scFv)和纳米抗体(Nanobody,也被称为VHH)均属于基因工程抗体,由于此类抗体分子质量小,穿透力强,半衰期短,免疫原性低,因此在疾病预防、诊断、治疗等方面具有重要作用和广阔的应用前景。
金斯瑞在单链抗体和纳米抗体研发工具试剂领域深耕多年,是全球领先的anti-scFv和anti-VHH单克隆抗体的供应商,金斯瑞通过提供单链抗体及纳米抗体研究整体解决方案,满足您在单链抗体和纳米抗体领域的绝大部分需求,包括检测、纯化、以及CAR-T细胞的表征和分离等。
现有scFv和VHH研究工具试剂
scFv和VHH具有非常广阔的应用前景,吸引了越来越多的研究机构和制药公司的关注。但是scFv和VHH均不含Fc片段,因此针对Fc片段的检测和纯化方法并不适用。此外,为了避免引入风险因素,制药企业通常在scFv或VHH上不会添加Flag、His等标签蛋白,且目前上市的相关药物也均不含这类标签蛋白,这就使得针对标签蛋白的检测和纯化策略也不适用。对于不含标签蛋白的scFv和VHH,目前的检测和纯化方法存在如下不足:
(1)针对scFv的通用型检测手段如Anti-Fab抗体和Protein L等并非特异性针对scFv开发的工具,因此仅能兼容部分scFv,且存在背景值偏高、检出率偏低等问题。
(2)此前尚未有高效的VHH通用型检测和纯化试剂。
(3)针对scFv或VHH的独特型检测工具如抗独特型抗体、抗原等,因其较长的开发周期、较高的成本和较低的适用性,无法广泛应用于scFv和VHH药物前期筛选阶段。
金斯瑞scFv及VHH研究整体解决方案
为支持scFv和VHH药物领域的研究,金斯瑞率先提出了scFv及VHH研究整体解决方案。我们提供了一整套scFv及VHH研究工具试剂,涵盖了scFv及VHH研究的各个环节,包括抗体发现、纯化、功能鉴定、慢病毒转导滴度测定、CAR-T细胞表征与分离以及亲和配基残留检测和药代动力学检测等,旨在为研究人员提供全面的支持,助力您在scFv及VHH研究中取得成功。
图1. scFv及VHH整体解决方案
Product Type | Species Specificity |
Unconjugated | Conjugated | |||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
HRP | Biotin | iFluor 488 |
iFluor 555 |
iFluor 647 |
PE | FITC | ||||
Anti-VHH antibody | Anti-Camelid VHH,mAb | Llama, Camel, Alpaca | A01860 | A01861 | A01995 | A01862 | A01863 | A01994 | A02227 | A02226 |
Anti-Humanized VHH, mAb | Humanized, Llama, Camel, Alpaca | A02165 | A02167 | A02166 | A02168 | A02169 | A02170 | A02171 | A02172 | |
Anti-Camelid VHH, mAb Cocktail | Humanized, Llama, Camel, Alpaca | A02014 | A02016 | A02015 | A02021 | A02020 | A02019 | A02018 | A02017 | |
Anti-scFv antibody | Anti-scFv Antibody Cocktail | Humanized, Mouse | A02282 | A02289 | A02283 | A02286 | A02287 | A02288 | A02285 | A02284 |
Anti-scFv Antibody Cocktail (Min X)* | Humanized, Mouse | A02306 | A02303 | A02304 | A02305 | A02315 | ||||
GS Linker Antibody | A02311 | A02314 | ||||||||
Application | ||||||||||
Flow cytometry | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | |||
Western blot / Dot blot | ✔ | ✔ | ✔ | |||||||
ELISA | ✔ | ✔ | ✔ | |||||||
Immunohistochemistry | ✔ | ✔ | ✔ | |||||||
Immunofluorescence | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | |||
Cell sorting | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ | ✔ |
*Anti-scFv antibody Cocktail (Min X)对人IgG、小鼠IgG 、山羊IgG 和兔IgG无交叉反应。
* L01033 VHH Affinity Ligand ELISA kit 中已包含 CaptureSelect™ AAVX 标准品, 如需检测 Capto AVB、CaptureSelect™ AAV8 或 CaptureSelect™ KappaXP,则需要单独购买标准品 AVB Affinity Ligand Standard(GenScript, Z03794)、AAV8 Affinity Ligand Standard(GenScript, Z03795) 或 KappaXP Affinity Ligand Standard (GenScript, Z03796)。
Product | Unconjugated | Conjugated | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
HRP | Biotin | iFluor 488 | iFluor 555 | iFluor 647 | PE | FITC | ||
Mouse Anti-Human IgG Fab Antibody (12H3C4A6), mAb | A01855 | |||||||
protein L | M00098 | M00097 | M00921 | M00922 | M00920 | |||
Mouse Anti-Human IgG Fc Antibody (50B4A9), mAb | A02257 | A01854 | ||||||
Streptavidin | Z02043 | M00091 | ||||||
MonoRab™ Rabbit IgG Control (Whole Molecule), mAb | A02022 | A02028 | A02027 | A02026 | A02025 | |||
Human Kappa Light Chain (2F1C1), mAb, Mouse | V06801 | |||||||
Human Lambda Light Chain (2D54), mAb, Mouse | V06901 | |||||||
MonoRab™ Biotin Antibody (53C8), mAb, Rabbit | V90201 | A02248 | A02249 | A02250 |
scFv和VHH特点
scFv和VHH虽然都属于基因工程小分子抗体,但在结构和理化性质上却有显著不同,具体性质对比见表1。
性质 | scFv | VHH |
---|---|---|
大小 | 28-35 KDa | 12-15 KDa |
血液半衰期 | <1h | ≪ 1h |
来源 | 小鼠、大鼠等 | 驼科 |
开发时间 | 较短 | 较长 |
水溶性 | 水溶性较好(+) | 水溶性好(+++) |
聚集 | 易聚集 | 几乎不聚集 |
稳定性 | 稳定性中等(+) | 稳定性优(++) |
耐极端环境 | 不耐高温或极端pH | 在高温和极端pH下保持稳定 |
组织穿透性 | 组织穿透性强(++) | 组织穿透性更强(+++) |
亲和力 | 亲和力高(+) | 亲和力更高(++) |
生产成本 | 低 | 更低 |
工程化改造 | 较容易改造(+) | 极容易改造(+++) |
表位多样性 | 与传统抗体一致 | 可提供新的表位 |
隐藏表位识别 | 较难识别隐藏表位 | 可识别隐藏表位 |
表达体系 | 原核、酵母、哺乳动物 | 原核、酵母、哺乳动物 |
*注:“+”代表该描述项的程度,“+”越多表明程度越高。
表1. scFv和VHH结构及理化性质对比
scFv和VHH应用
scFv和VHH 具有分子质量小、穿透力将强、制备周期短、结构简单、易于工程化改造等优点,在细胞治疗、双特异性抗体构建、实体瘤治疗、药物递送等领域较于全长抗体具有独特的优势。除此之外,scFv和VHH还被广泛应用于病毒感染、生物监测、生物传感器、基础生物学研究等。随着研究的不断深入,相信在不久的将来,scFv和VHH 将凭借自身的优势,在医学、农业、工业等领域发挥更巨大的应用。
图2. scFv及VHH的应用